Аналіз показує, у якій частці сперматозоїдів пошкоджена ДНК. Звичайна спермограма цього не бачить, тому тест на фрагментацію ДНК сперматозоїдів призначають при невдалих спробах ЕКЗ, завмерлих вагітностях і безплідді з нормальною спермограмою.
Коротко:
- Результат – протягом 4 годин у день здачі
- Зразок приймає ембріолог, дослідження – у власній лабораторії ДРТ клініки
- Якщо фрагментація висока, у клініці є відбір сперматозоїдів методами ПІКСІ і чіпування
- Прийом 7 днів на тиждень, лівий берег, поруч з ТЦ «Караван»
→ Записатися на аналіз
Що показує аналіз і чому спермограми недостатньо
Сперматозоїд передає ембріону половину генетичного матеріалу, щільно укладеного в нитку ДНК. Коли в цій нитці є розриви, йдеться про фрагментацію. ДНК-фрагментація сперми під звичайним мікроскопом не видна: клітина з ушкодженою ДНК може мати правильну форму, добру рухливість і без зауважень пройти спермограму.
Спермограма рахує кількість, концентрацію, рухливість і морфологію сперматозоїдів, але про цілісність генетичного матеріалу нічого не каже. Аналіз фрагментації ДНК сперматозоїдів заповнює цю прогалину: визначає, який відсоток клітин в еякуляті має розриви ДНК. Цей показник називають індексом фрагментації ДНК, або DFI.
Навіщо це знати: при високій фрагментації яйцеклітина може запліднитися, але ембріон частіше зупиняється в розвитку, а вагітність частіше переривається на ранньому терміні. Тож аналіз допомагає побачити чоловічий фактор там, де спермограма в нормі, і обрати тактику ще до програми ЕКЗ, а не після невдалої спроби. У направленнях аналіз може називатися інакше: ДНК фрагментація, DFI, SDF, тест на цілісність ДНК.
Кому призначають аналіз
Тест на ДНК фрагментацію радить уролог-андролог або репродуктолог. Основні показання:
- пара не може зачати понад рік, хоча спермограма без відхилень;
- дві чи більше завмерлих вагітностей або викиднів на ранньому терміні, особливо коли з боку жінки причин не знайшли;
- невдалі спроби ЕКЗ, ІКСІ чи інсемінації, низька якість ембріонів;
- варикоцеле, перенесені інфекції та запалення сечостатевої системи;
- відхилення у спермограмі;
- вік чоловіка 40 років і більше;
- робота у шкідливих умовах, контакт з токсинами, часте перегрівання;
- підготовка до ЕКЗ: у клініці тест входить в обстеження чоловіка перед програмою разом зі спермограмою, MAR-тестом, HBA-тестом і консультацією андролога;
- контроль лікування, якщо високу фрагментацію вже знаходили раніше.
Рішення про аналіз лікар ухвалює за історією пари та результатами попередніх обстежень.
Причини високої фрагментації ДНК
Розриви ДНК з’являються, коли сперматозоїди дозрівають або зберігаються в несприятливих умовах. Головний механізм – оксидативний стрес: надлишок вільних радикалів ушкоджує генетичний матеріал. Його спричиняють:
- варикоцеле – розширення вен яєчка, через яке тканина перегрівається;
- інфекції, запальні процеси, висока температура тіла;
- куріння, алкоголь, наркотичні речовини;
- перегрівання: лазня, сауна, гарячі ванни;
- зайва вага і цукровий діабет;
- хіміотерапія та опромінення;
- токсини та шкідливі умови праці;
- вік: після 40 років частка сперматозоїдів з ушкодженою ДНК зазвичай зростає;
- рідке статеве життя: що довше сперматозоїди перебувають у сім’явивідних шляхах, то вищий індекс фрагментації.
Більшість цих чинників можна усунути. Високий результат – привід шукати причину, а не вирок чоловічій фертильності.
Тест на фрагментацію ДНК: підготовка по етапах
Сперматозоїди дозрівають приблизно 2,5-3 місяці, тому спосіб життя за цей час відбивається в аналізі. Від підготовки залежить, наскільки точним буде результат, тож починати її варто заздалегідь.
За 2-3 місяці
- Кинути курити та обмежити алкоголь. Повністю виключити алкоголь і тютюн потрібно щонайменше за 2 тижні до тесту.
- Пролікувати запалення сечостатевої системи. Після лікування аналіз здають не раніше ніж через 2 тижні.
- Обговорити з лікарем препарати, які ви приймаєте. Антибіотики, деякі ліки від тиску, блокатори H2, психотропні засоби й антидепресанти за погодженням з лікарем скасовують щонайменше за 14 днів.
За тиждень
- Не відвідувати лазню і сауну, не приймати гарячих ванн.
- Зменшити фізичне навантаження.
- Відмовитися від гострої та жирної їжі.
- Якщо була застуда з температурою, перенести здачу: аналіз здають через 7-10 днів після одужання.
За 3-7 днів
- Дотримуватися статевої стриманості: не менше 3 і не більше 7 днів. Коротший чи довший термін спотворює результат, і аналіз доведеться перездати.
У день здачі
- Виспатися і по можливості уникати стресу.
- Не використовувати лубриканти і презервативи для збору зразка.
- Зібрати весь еякулят у стерильний контейнер: втрата першої порції спотворює результат.
Як здають аналіз і коли готовий результат
Здача така сама, як при спермограмі:
- Ви записуєтеся на зручний час: клініка приймає 7 днів на тиждень.
- Еякулят збирають шляхом мастурбації у стерильний контейнер.
- Зразок приймає ембріолог і передає у власну лабораторію ДРТ клініки.
- Результат готовий протягом 4 годин у день здачі.
- З результатом ви йдете до лікаря, який призначив аналіз: уролога-андролога або репродуктолога.
Зробити аналіз у Дніпрі можна в клініці «Аврора ДРТ» на лівому березі, поруч з ТЦ «Караван». Клініка працює з 2011 року, тут же можна пройти спермограму, MAR-тест і HBA-тест, а за потреби продовжити обстеження і лікування.
Методи дослідження: SCD, TUNEL та інші
Фрагментацію ДНК сперматозоїдів оцінюють кількома лабораторними методами, які відрізняються принципом:
| Метод | Принцип | Що рахують |
|---|---|---|
| SCD (Halo, тест дисперсії хроматину) | Ядра обробляють реагентами: ціла ДНК розкручується петлями й утворює ореол, фрагментована дає малий ореол або не утворює його | Частку сперматозоїдів без ореолу чи з малим ореолом |
| TUNEL | Мічені нуклеотиди (dUTP) приєднуються до кінців розривів ДНК, ушкоджені клітини світяться під флуоресцентним мікроскопом або в проточному цитометрі | Частку клітин, що світяться |
| SCSA | ДНК піддають кислотній денатурації, забарвлення вимірюють на проточному цитометрі | DFI за тисячами клітин |
| COMET | Електрофорез окремих клітин: фрагменти ДНК витягуються «хвостом комети» | Довжину та яскравість хвоста |
TUNEL виявляє самі розриви, SCD оцінює їх опосередковано, за реакцією хроматину. Результати різних методів не можна порівнювати напряму: у кожного свої пороги. Тому повторний аналіз краще робити тим самим методом і в тій самій лабораторії. Яким методом виконується дослідження в клініці, уточніть під час запису.
Результат: індекс фрагментації ДНК (DFI)
Підсумок дослідження – один показник у відсотках, тобто частка клітин з ушкодженою ДНК. Загальноприйняті орієнтири:
| DFI | Рівень | Що це означає |
|---|---|---|
| до 15% | низький | Цілісність ДНК добра, цей чинник шанси на природне зачаття не знижує |
| 15-30% | середній | Природне зачаття можливе, але ймовірність знижена, лікар шукає причину |
| понад 30% | високий | Шанс природної вагітності та якість ембріонів знижені, потрібна корекція, а при ЕКЗ – вибір способу відбору сперматозоїдів |
Межі орієнтовні: пороги залежать від методу і лабораторії, тому результат оцінюють за референсами в бланку і разом з лікарем. Один аналіз – це зріз на момент здачі, після лікування показник може змінитися.
Що робити при високому результаті
- Знайти причину. З результатом потрібна консультація уролога-андролога: лікар призначить огляд і аналізи, щоб з’ясувати, що спричинило ушкодження.
- Лікувати причину. Усувають варикоцеле, інфекції та запалення, коригують вагу, відмовляються від куріння і перегрівання. Антиоксиданти та вітаміни приймають лише за призначенням лікаря.
- Повторити аналіз через 3 місяці. Стільки триває цикл дозрівання сперматозоїдів, раніше змін не буде видно.
- Обрати метод при ЕКЗ. Якщо показник лишається високим або часу в пари обмаль, запліднення проводять методом ІКСІ з відбором сперматозоїдів. У клініці доступні ПІКСІ – відбір зрілих клітин, які зв’язуються з гіалуроновою кислотою, і чіпування – відбір на мікрофлюїдному чипі ZyMōt Multi, де найрухливіші сперматозоїди самі проходять крізь мембрану без центрифугування.
Більше про діагностику і лікування чоловічого фактора – на сторінці безпліддя у чоловіків.
Що здати разом з аналізом
Фрагментація оцінює лише один параметр, тому її призначають у комплексі з іншими дослідженнями еякуляту:
| Аналіз | Що показує |
|---|---|
| Спермограма | Об’єм еякуляту, кількість, концентрацію, рухливість і морфологію сперматозоїдів |
| MAR-тест | Частку сперматозоїдів, вкритих антиспермальними антитілами |
| HBA-тест | Зрілість сперматозоїдів за зв’язуванням з гіалуроновою кислотою, допомагає вирішити, чи потрібен ПІКСІ |
Фрагментація і морфологія – різні показники. Сперматозоїд правильної форми може мати ушкоджену ДНК, а погана морфологія не завжди означає високу фрагментацію, тому лікар дивиться на обидва результати разом. Якщо пара готується до ЕКЗ, зручніше пройти обстеження пари перед програмою ЕКЗ в одній клініці.
Записатись